星期一早晨来到实验室。打开电脑查看上周的数据。上周的实验结果不理想。细胞生长速度很慢。培养基颜色不对劲。可能污染了。需要重新准备实验材料。
上午九点去细胞房。超净工作台紫外线消毒三十分钟。取出冻存的细胞。水浴锅温度三十七度。快速融化细胞悬液。离心机设置一千转。离心五分钟。弃去上清液。加入新鲜培养基。吹打均匀。分装到三个培养瓶。放入二氧化碳培养箱。温度三十七度。二氧化碳浓度百分之五。
记录操作步骤。写明细胞种类。注明传代时间。记录培养基批号。这些细节很重要。论文需要准确数据。
星期二观察细胞状态。显微镜下看细胞。细胞贴壁情况良好。形态正常。没有发现污染。测量细胞密度。计数板显示每毫升八十万个细胞。这个密度适合实验。
准备实验试剂。称量氯化钠。称量葡萄糖。称量氨基酸。溶解在去离子水中。调节酸碱度。过滤除菌。分装到无菌试管。贴上标签写明成分浓度。
下午阅读文献。找到一篇相关论文。这篇论文方法类似。可以参考他们的实验设计。打印出来重点部分。用荧光笔标记关键句子。
星期三开始正式实验。分组处理细胞。对照组加入普通培养基。实验组加入药物培养基。药物浓度不同。十个浓度梯度。每个浓度三个重复。小心操作避免交叉污染。
放置培养箱。设定时间点。分别在六小时、十二小时、二十四小时取样。取样前预热离心机。准备冰盒。预冷磷酸缓冲液。
中午休息半小时。吃饭。喝咖啡。查看邮件。导师询问实验进度。回复邮件说明情况。
下午继续实验。第一个时间点取样。取出培养瓶。吸出培养基。磷酸缓冲液清洗两次。加入胰酶消化。计时三分钟。显微镜观察细胞脱落情况。加入培养基终止消化。吹打均匀。转移至离心管。离心收集细胞。
分成三份。一份用于检测活性。一份提取蛋白质。一份提取核糖核酸。标记清楚样品信息。日期时间组别。放入负八十度冰箱保存。
记录实验过程。遇到问题。消化时间过长。部分细胞死亡。下次需要调整时间。
星期四检测细胞活性。取出冻存样品。冰上融化。加入检测试剂。避光反应三十分钟。上机检测。机器发出嗡嗡声。屏幕显示曲线。记录吸光度数值。
计算细胞存活率。对照组百分之一百。实验组随浓度增加存活率下降。高浓度组存活率只有百分之三十。这个结果符合预期。
提取蛋白质样品。加入裂解液。冰上放置三十分钟。离心取上清液。测定蛋白质浓度。绘制标准曲线。样品浓度在正常范围。
准备蛋白质电泳。配制凝胶。灌胶。插入梳子。等待凝固。加载样品。设置电压。开始电泳。观察染料前沿移动。
星期五分析数据。打开电脑软件。输入实验数据。制作统计图表。柱状图显示存活率变化。折线图显示浓度效应。计算标准差。进行显著性分析。
结果有统计学意义。药物确实抑制细胞生长。抑制程度与浓度相关。这个结论支持研究假设。
整理本周记录。写下成功的地方。细胞培养成功。实验完成顺利。数据质量较好。
写下需要改进的地方。消化时间需要优化。某个试剂批次可能有问题。下次换新批次试试。
列出下周计划。重复实验验证结果。进行更深入的机制研究。检测相关蛋白表达。预约共聚焦显微镜。
打印本周报告。签字。放入文件夹。清理实验台。洗刷试管培养瓶。高压灭菌废弃物。关闭仪器电源。检查培养箱温度。填写使用登记本。
离开实验室。天色已黑。路灯亮着。回宿舍休息。周末需要休息。下周继续工作。